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Nano-500與某知名進口品牌的DNA檢測性能比較

Nano-500-2.jpg

1.Nano系列微量分光光度計


超微量分光光度計是一類能夠迅速定量且無損DNA樣品的儀器。同時因該方法無需額外的試劑和標準品,操作步驟簡單方便,因而備受各類生物實驗室的喜愛。其主要利用了DNA在近紫外光區波長260nm處有最大的吸收峰,從而可以定量樣品中DNA的濃度。

用經典的基于比色皿的分光光度計進行DNA濃度檢測時,一般需要較大的樣本體積,同時檢測范圍也相對有限。而Nano系列微量分光光度計僅需2ul的微量樣本便可實現方便快捷的檢測方式。



圖1 Nano-500的樣品檢測


2.優化的檢測方式


Nano系列微量分光光度計是利用表面張力將小量樣品保持在兩個基座之間,無需事先稀釋便可對高濃度樣品進行檢測,它使用的2048像素線陣CCD傳感器可更加準確的獲得光譜數據,內置的分析軟件能夠將結果自動轉換為1cm光徑下相對應的讀值并以報告格式輸出。我們采用的獨特的光纖設計能有效減少光散射現象,同時樣品與儀器的完全封閉式檢測方式也能成功避免空氣中雜質對光強的分散,從而使檢測樣品結果更為精確(圖2)。

2. Nano-500測量樣品的光路圖


3.DNA樣本的檢測


我們將約為12000ng/ul的高濃度鮭魚精dsDNA(純度98%)用TE緩沖液梯度稀釋10次,每次稀釋1倍,將稀釋好的樣品分別在Nano-500與某品牌上進行檢測。由圖3可以看出Nano-500與某品牌的檢測結果均是線性的,R2均為0.999,即相同條件下,Nano-500和某品牌檢測核酸濃度的準確性是一致的,在跨度3個數量級的濃度范圍內,二者的輸出也均保持穩定。

進口品牌.jpg500.jpg

圖3.  某知名進口品牌與Nano-500的DNA濃度檢測


將每個樣品重復測試5次,分別計算Nano-500和某品牌的CV值,由表1可以看出二者在穩定性方面均表現優秀,CV值大部分均小于1% 。在低濃度樣品的檢測中Nano-500和某品牌的穩定性均略有降低,CV均超出2% 。


表1 某知名進口品牌與Nano-500的穩定性檢測

書籍.jpg


4.Nano-500的優勢


Nano-500是Nano系列2019年新產品,專利設計的自動升降檢測臂結構有效的避免因樣品斷裂而造成測量不準的情況,新增的自動空白與自動檢測的功能也會極大的縮短測量的時間。附加的熒光檢測功能僅需搭配高靈敏的熒光分析試劑盒,便可精確定量DNA濃度,最低檢測下限可達到0.5pg/ul。


5.如何獲得更優的檢測結果


1.加樣量理論值0.5-2.0ul,建議2.0ul;

2.檢測前后清洗基座3次;

3.空白校對:目標分析物的相同緩沖液;

4.通常情況無需檢測空白溶液,若檢測,溶液濃度需0-1.0ng/ul,且波長范圍內的所有OD值均應在±0.04內,超過該標準建議重新做空白校對。


6.總結


現在使用Nano系列微量分光光度計精確、重復的檢測DNA(或RNA)的數值變得更加容易,其定量檢測結果的下限可與傳統的UV-Vis分光光度計相媲美,內置軟件不但會自動算出其濃度,還可以給出相應的純度(A260/280、A260/230)判斷,這將為后續的實驗節省更多的時間。


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此文關鍵詞:微量分光光度計
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